Information

我们推荐有以下需求的用户使用该试剂盒：

• 希望为多达96个样本混样测序以降低单个样本的测序成本
• 希望在短时间内制备文库
• 希望通过免扩增的方式混样建库，以保留碱基修饰等信息。
• 当前实验器材有限

请注意：使用本试剂盒，您需要购买额外的第三方试剂：详情请见“第三方材料”板块。

当单张测序芯片能产出的总数据量高于单个样本所需数据量时，将多个样本混样测序再进行条码拆分，可提高芯片的利用效率，并节省用户对单个样本的测序支出。

快速条形码测序试剂盒-96 V14 的特点：

快速条形码测序试剂盒-96 V14（SQK-RBK114.96）为一款可独立使用的试剂盒，以操作简便速度快捷著称，且无需借助PCR扩增即可为多达96个样本建库并混样测序。本试剂盒的核心成分为转座酶。它能够在切割模板分子的同时，将带有条形码的标签连接至酶切端。本试剂盒内含96种不同条形码。

该试剂盒采用最新的试剂盒 14系列试剂，当与我们最新推出的纳米孔R10.4.1联用时，原始序列准确率众数进一步提高且产出量增大。我们已重新调配测序芯片预处理试剂和测序试剂，以兼容经过改良的试剂盒14系列测序接头及R10.4.1纳米孔。

试剂盒14系列亦沿用了之前产品的优势，例如：接头的核酸链捕获率更高，因此测序芯片的文库上样量更低；接头采用能量稳固技术，免去用户在操作用时较长的测序实验时，中途向芯片添加额外能量。

请注意：本试剂盒虽能产出质量值在Q20以上的高准确率测序数据，且可产出互补双链数据，但试剂盒以简便快捷为首要优化目标。如您对准确度有较高要求，我们推荐您使用我们的免扩增条形码测序试剂盒-96 V14（SQK-NBD114.96）。

尽管本试剂盒中的转座酶能片段化样本，但因本实验流程简单且仅涉及少量的样本操作（无纯化步骤且仅保留必要的移液步骤），因此当样本中含有长片段时，会输出一定量的长读长测序结果。如希望测序产出长读长，则起始材料中必须含有长片段。

本工作流程不涉及PCR扩增步骤，因此不存在扩增偏倚并保留了序列中的碱基修饰信息。您可使用纳米孔社区开发的工具对其进行分析。

更多信息：

本试剂盒推荐的每个样本的起始gDNA用量为200ng。如gDNA起始量少于200ng，则可能影响测序产出和读长。

运输和物流：

测序芯片和试剂盒均置于环保且控温的装运箱中一起运输。

大陆地区工作日均可发货，根据运输情况1-3天到达。港澳台地区每周一从英国发货。

Workflow

快速条形码测序试剂盒-96 V14 可为纯化的基因组DNA添加条码，完成混样建库。试剂盒的核心成分为转座酶，它能在切割模板分子的同时，将含条形码的标签连接至酶切端。混合各含条码样本后，使用SPRI磁珠纯化，再将快速测序文库接头与含条形码的标签端连接。

Protocols

• 基因组DNA快速建库测序 V14- 条形码试剂盒 （SQK-RBK114.24 或 SQK-RBK114.96）
• SARS-CoV-2 病毒叠瓦式扩增 - 快速条形码测序试剂盒-96 V14 联合 SARS-CoV-2长片段（Midnight）叠瓦式反转录扩增扩展包 (SQK-RBK114.96和EXP-MRT001)
• 快速建库测序 V14 - 质粒测序 (SQK-RBK114.24 或 SQK-RBK114.96)
• 快速建库测序 V14 - 扩增子测序 (SQK-RBK114.24 或 SQK-RBK114.96)

Safety and legal

安全数据表 - SQK-RBK114.96

What's in the box

快速条形码测序试剂盒-96 V14 （SQK-RBK114.96）内含试剂可供十二次反应使用。

声明：本产品包含由贝克曼库尔特公司（Beckman Coulter, Inc）生产的 AMPure XP 试剂，并可与试剂盒一起于-20°C 下储存（试剂稳定性将不受损害）。

3rd party materials

耗材

• 1.5 ml Eppendorf DNA LoBind 离心管
• 2 ml Eppendorf DNA LoBind 离心管
• 0.2 ml薄壁PCR管
• Eppendorf低吸附twin.tec®96孔PCR板，半裙边（目录号：0030129504）带热封
• 无核酸酶水（如ThermoFisher，目录号AM9937）
• 新制备的80％乙醇（用无核酸酶水配制）
• (非必需）牛血清白蛋白 (BSA) (50 mg/mL) （例如Invitrogen™ UltraPure™ BSA (50 mg/mL) 目录号 AM2616）

器材

• 盛有冰的冰桶
• 微孔板离心机，如Fisherbrand™ 微孔板迷你离心机 （Fisher Scientific, 目录号11766427）
• 计时器
• 温度设定为30℃及80℃的热循环仪或恒温加热仪
• 磁力架
• Hula混匀仪（低速旋转式混匀仪）
• P1000移液枪和枪头
• P200移液枪和枪头
• P100移液枪和枪头
• P20移液枪和枪头
• P2移液枪和枪头
• 多通道移液枪

可选器材

• Qubit荧光计（或用于质控检测的等效仪器）

Compatibility

快速条形码测序试剂盒-96 V14 （SQK-RBK114.96）可与以下产品联用：

试剂盒

• 测序辅助扩展包 V14 (EXP-AUX003)
• 测序芯片清洗试剂盒 (EXP-WSH004)
• 测序芯片预处理试剂盒 V14 (EXP-FLP004)
• 测序芯片预处理试剂盒-XL (EXP-FLP004-XL)
• 快速测序文库接头辅助扩展包 V14 (EXP-RAA114)
• SARS-CoV-2长片段（Midnight）叠瓦式反转录扩增扩展包 (EXP-MRT001)
• Lambda 标准品扩展包 (EXP-CTL001)

测序芯片

R10.4.1:

• FLO-MIN114
• FLO-PRO114M
• FLO-FLG114

测序设备

• MinION Mk1B
• MinION Mk1C
• GridION
• PromethION