Information
我们推荐有以下需求的用户使用该试剂盒:
- 希望混样测序以降低单个样本的测序成本
- 希望通过免扩增的方式混样建库,以保留碱基修饰等信息。
- 希望在短时间内制备文库
- 当前实验器材有限
请注意:使用本试剂盒,您需要购买额外的第三方试剂:详情请见“第三方材料”板块。
当单张测序芯片能产出的总数据量高于单个样本所需数据量时,将多个样本混样测序再进行条码拆分,可提高芯片的利用效率,并节省用户对单个样本的测序支出。
快速条形码测序试剂盒96的特点:
该试剂盒以简便快捷为优化目标,而非达到最大通量。尽管本试剂盒中的转座酶能片段化样本,但因本实验流程简单且仅涉及少量的样本操作,因此当样本中含有长片段时,会输出一定量的长读长测序结果。如希望测序产出长读长,则起始材料中必须含有长片段。
本工作流程不涉及PCR扩增步骤,因此不存在扩增偏倚并保留了序列中的碱基修饰信息。您可使用纳米孔社区开发的工具对其进行分析。
MinKNOW及Guppy软件支持混样测序数据的条码拆分,并按条码将序列片段分类并分配至相应文件夹。
更多信息:
本试剂盒针对含有长片段(>30 kb)的样本进行过优化,且推荐的每个样本的起始gDNA用量为50 ng。如gDNA起始量少于50ng或样本片段较短,则可能影响测序通量和读长。如起始样本量较低,您可考虑使用快速PCR条形码试剂盒。
运输和物流:
测序芯片和试剂盒均置于环保且控温的装运箱中一起运输。
大陆地区工作日均可发货,根据运输情况1-3天到达。港澳台地区每周一从英国发货。
Workflow
快速条形码测序试剂盒96可在60分钟内为纯化的基因组DNA添加条码,完成混样建库。试剂盒的核心成分为转座酶,它能在切割模板分子的同时,将含条形码的标签连接至酶切端。混合各含条码样本后,使用SPRI磁珠纯化,再将快速测序文库接头与转座酶接头连接。本试剂盒提供96种带不同条形码的标签。

What's in the box

名称 | 缩写 | 管盖颜色 | 管数 | 每管溶液体积 (μl) |
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快速条码板 | RB96 | - | 3板 | 每孔 8 µl |
AMPure XP 磁珠 | AXP | 棕色 | 3 | 1200 |
测序缓冲液 II | SBII | 红色 | 1 | 500 |
快速测序文库接头 F | RAP-F | 绿色 | 1 | 25 |
洗脱缓冲液 | EB | 黑色 | 1 | 500 |
上样颗粒II | LBII | 粉色 | 1 | 360 |
上样溶液 | LS | 白色管盖,贴有粉色标签 | 1 | 400 |
冲洗系绳 | FLT | 紫色 | 1 | 400 |
冲洗缓冲液 | FB | 白色 | 1瓶 | 15500 |
本品内含由贝克曼库尔特有限公司(Beckman Coulter, Inc)生产的AMPure XP试剂。