Information
我们推荐有以下需求的用户使用该试剂盒:
- 希望提高测序实验通量
- 希望对 2-3 个样本进行全基因组测序 (WGS)
- 希望通过免扩增的方式混样建库,以保留碱基修饰等信息
- 需要控制读长
- 希望利用上游处理工序(如片段大小选择或全基因组扩增)
- 希望使用多通道移液枪或移液机器人同时处理多个样本
本品为早期试用产品
如需有关早期试用计划的更多信息,请参阅 本文了解产品的不同发布阶段。
请注意:使用本试剂盒,您需要购买额外的第三方试剂:详情请见“第三方材料”板块。
作为一款独立试剂盒,混样连接测序试剂盒-XL内含96种不同条形码,可为基因组DNA和扩增子等双链DNA样本在免扩增的条件下添加条码。试剂盒提供的2-3个样本混样建库方案,为全基因组测序 (WGS) 的应用提供了更简单的工作流程,方便用户鉴别突变常见和易发区域。
使用本试剂盒进行文库制备的方法与使用连接法建库测序试剂盒相似:首先,使用NEBNext FFPE DNA修复混合液和NEBNext末端修复/dA尾添加模块对DNA末端进行修复和dA尾添加;接着将条形码接头的dT尾端与DNA的dA尾端连接;然后将带有不同条形码序列的样本混合,再将条形码接头的粘性末端与测序接头连接。
我们建议每个样本使用 1 μg gDNA。手动方案推荐于每张测序芯片上为两个样本测序,从而可在48张芯片上测序96个样本。我们亦全面支持使用Hamilton NGS Star 96移液工作站的自动化方案:用户可选择于每张测序芯片上为两个样本测序,或在两张芯片上三个样本测序。
本混样连接测序试剂盒-XL(“试剂盒11”系列)内所含的测序接头 II T(AMII T)具有以下两个主要特征:一,接头的核酸链捕获率更高,因此测序芯片的文库上样量更低。二,接头采用能量稳固技术,免去用户在操作用时较长的测序实验时,中途向芯片添加额外能量。
运输和物流:
测序芯片和试剂盒均置于环保且控温的装运箱中一起运输。
大陆地区工作日均可发货,根据运输情况1-3天到达。港澳台地区每周一从英国发货。
Workflow
使用本试剂盒制备文库的方法与使用连接测序试剂盒相似:首先,使用NEBNext FFPE DNA修复混合液和NEBNext末端修复/dA尾添加模块对gDNA末端进行修复和dA尾添加;接着将条形码接头的dT端与DNA的dA尾端连接;然后将带有不同条形码序列的样本混合,再将条形码接头的粘性末端与测序接头连接。

What's in the box
混样连接测序试剂盒-XL内含试剂可支持48个反应:

名称 | 缩写 | 管盖颜色 | 管数 | 每管溶液体积 (μl) |
---|
测序接头 II T | AMII T | 绿色 | 1 | 320 |
测序缓冲液 II | SBII | 红色 | 4 | 1,500 |
上样颗粒 II | LBII | 粉色 | 2 | 1,500 |
上样溶液 | LS | 白色管盖,粉色贴纸 | 2 | 1,500 |
EDTA | EDTA | 透明 | 1 | 700 |
洗脱缓冲液 | EB | 15 ml 小瓶 | 1 | 10,000 |
长片段缓冲液 | LFB | 30 ml 小瓶 | 3 | 15,000 |
冲洗缓冲液 XL | FB | 30 ml 小瓶 | 4 | 15,500 |
冲洗系绳 | FLT | 白色管盖,紫色贴纸 | 1 | 1,600 |
面扩增条形码 | NB01-96 | 不适用 | 1 盘 | 每孔 8 µl |