Information

我们强烈推荐有以下需求的用户使用该试剂盒：

• 起始样本有限
• 希望提高测序实验通量
• 希望识别并量化全长转录本
• 希望分析差异基因表达或差异转录本使用率
• 希望鉴定并定量异构体、剪接变体及融合转录本

请注意：使用本试剂盒，您需要购买额外的第三方试剂：详情请见“第三方材料”板块。

PCR-cDNA测序试剂盒可为低至1 ng的起始材料（即带poly-A尾的RNA）制备用于纳米孔测序的cDNA文库。用户亦可使用50ng 未经poly-A尾富集操作的总RNA作为起始材料，但可能需对实验条件进行额外优化

本试剂盒提供的寡核苷酸可为带poly-A尾的全长RNA进行互补链合成和链转换。再借助含5’端标签的引物合成双链cDNA。该标签可促成样本与快速测序接头的快速接合（不依赖连接酶）。

PCR-cDNA测序试剂盒的特点：

更多信息

PCR-cDNA条形码测序试剂盒（SQK-PCB109）可替代PCR-cDNA测序试剂盒，为多达12个不同的RNA样本添加条码，实现在同一张上芯片的混样测序。

运输和物流：

测序芯片和试剂盒运输条件：2–8°C。

收到后，请按照试剂盒上的说明妥善储存产品。

不同地区的发货时间如下：

Workflow

首先使用本试剂盒提供的寡核苷酸，对含poly-A尾的全长RNA进行互补链合成和链转换。再借助含5’端标签的引物合成双链cDNA。该标签可促成样本与快速测序接头的快速接合（不依赖连接酶）。

Protocols

• cDNA-PCR 测序

• 序列特异性cDNA-PCR 测序

请注册纳米孔社区账户，以获取上述实验指南。

Safety and legal

PCR-cDNA 测序试剂盒（SQK-PCS109）的安全数据表

测序芯片预处理试剂盒的安全数据表

What's in the box

PCR-cDNA测序试剂盒可供制备六次文库。

测序芯片预处理试剂盒将一并供应。

3rd party materials

耗材

• 1.5ml Eppendorf DNA LoBind离心管
• 0.2 ml薄壁PCR管
• 无核酸酶水（如ThermoFisher，目录号AM9937）
• 新制备的70％乙醇（用无核酸酶水配制）
• Agencourt AMPure XP磁珠
• 10mM 脱氧核糖核苷三磷酸（dNTP）溶液（例如，NEB 目录号 N0447）
• LongAmp Taq 2X 预混液（如，NEB 目录号 M0287）
• Maxima H Minus 逆转录酶（200 U/µL），与 5X RT 缓冲液一起提供（ThermoFisher，目录号 EP0751）
• RNaseOUT™，40 U/μl （Life Technologies，目录号 10777019）
• 核酸外切酶I （NEB，目录号 M0293）

器材

Hula混匀仪（低速旋转式混匀仪）

• 磁力架
• 迷你离心机
• 涡旋混匀仪
• 盛有冰的冰桶
• 计时器
• 热循环仪
• P1000移液枪和枪头
• P100移液枪和枪头
• P20移液枪和枪头
• P10移液枪和枪头
• P2移液枪和枪头
• 适用于200 µl离心管的、置于-20℃下预冷的低温冰浴盒（例如，Eppendorf 目录号 022510509）

可选器材

• Agilent生物分析仪（或等效仪器）
• Qubit荧光计（或用于质控检测的等效仪器）
• Eppendorf 5424 离心机（或等效器材）

Compatibility

PCR-cDNA测序试剂盒可与以下产品联用：

试剂盒

• 测序芯片清洗试剂盒（EXP-WSH004）

测序芯片

• FLO-MINSP6
• FLO-MIN106D
• FLO-PRO002

测序仪

• MinION Mk1B
• MinION Mk1C
• GridION
• PromethION